◎ बहुमुखी, भरपर्दो अन-डिमान्ड तरल ह्यान्डलिङका लागि माइक्रोस्विचहरू

www.chinacdoe.com भ्रमण गर्नुभएकोमा धन्यवाद।तपाईंले प्रयोग गरिरहनुभएको ब्राउजर संस्करणमा सीमित CSS समर्थन छ।उत्तम अनुभवको लागि, हामी तपाईंलाई अपडेट गरिएको ब्राउजर प्रयोग गर्न सिफारिस गर्छौं (वा इन्टरनेट एक्सप्लोररमा अनुकूलता मोड असक्षम गर्नुहोस्)।यस बीचमा, निरन्तर समर्थन सुनिश्चित गर्न, हामी शैली र जाभास्क्रिप्ट बिना साइट रेन्डर गर्नेछौं।

साइट क्षमताहरू भएका ल्याब-अन-ए-चिप प्रणालीहरूले द्रुत र सही निदानको लागि सम्भाव्यता प्रदान गर्दछ र जैव चिकित्सा उपकरण र प्रशिक्षित पेशेवरहरू उपलब्ध नहुने स्रोत-प्रतिबन्धित सेटिङहरूमा उपयोगी हुन्छन्।यद्यपि, बहु-कार्यात्मक वितरण, अन-डिमांड रिलीज, भरपर्दो कार्यसम्पादन, र अभिकर्मकहरूको दीर्घकालीन भण्डारणको लागि सबै आवश्यक सुविधाहरू भएको पोइन्ट-अफ-केयर परीक्षण प्रणाली सिर्जना गर्नु प्रमुख चुनौती बनेको छ।यहाँ हामी एक लीभर-एक्युटेड माइक्रो ट्राभल स्विच टेक्नोलोजीको वर्णन गर्छौं जसले तरल पदार्थलाई कुनै पनि दिशामा हेरफेर गर्न सक्छ, लागू गरिएको हावाको चापमा सटीक र समानुपातिक प्रतिक्रिया प्रदान गर्न सक्छ, र अचानक चालहरू र कम्पनहरू विरुद्ध स्थिर रहन्छ।टेक्नोलोजीको आधारमा, हामी पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया प्रणालीको विकासको पनि वर्णन गर्छौं जसले अभिकर्मक परिचय, मिश्रण र प्रतिक्रिया प्रकार्यहरू सबैलाई एउटै प्रक्रियामा एकीकृत गर्दछ, जसले 18 बिरामीहरूबाट सबै क्लिनिकल नाक नमूनाहरूको लागि "नमूना-इन-उत्तर-आउट" कार्यसम्पादन गर्दछ। इन्फ्लुएन्जा र 18 व्यक्तिगत नियन्त्रणहरू, मानक पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया (Pearson coefficients > 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रताको राम्रो संगतमा।टेक्नोलोजीको आधारमा, हामी एक पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया प्रणालीको विकासको पनि वर्णन गर्छौं जसले अभिकर्मक परिचय, मिश्रण र प्रतिक्रिया प्रकार्यहरू सबैलाई एउटै प्रक्रियामा एकीकृत गर्दछ, जसले 18 बिरामीहरूबाट सबै क्लिनिकल नाक नमूनाहरूको लागि "नमूना-इन-उत्तर-आउट" प्रदर्शन पूरा गर्दछ। इन्फ्लुएन्जा र 18 व्यक्तिगत नियन्त्रणहरू, मानक पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया (Pearson coefficients > 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रताको राम्रो संगतमा।Основываясь на тех тех техннологии си тех также описткем ристкемеразной репной репной ренко отой ретяет ункци Всечиваниваниваниваниваниваниваечиваечиваечиваечиваечиваечиваечиваечиваечиваечиваечиваечивает вы оном выспечивает в обеспечивает выпечивает выпечивает выполнение что обеспечивает выполнение в образецие в-ответ-выхо к клиничических образцов и 1 иациентов с грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандарткой полимеразной полимеразной Полимеразной цепициней मा> ०,९)।यस प्रविधिको आधारमा, हामीले पोलिमरेज चेन रियाक्सन प्रणालीको विकासको पनि वर्णन गर्छौं जसले 18 इन्फ्लुएन्जा बिरामीहरूबाट सबै क्लिनिकल नाक नमूनाहरूका लागि नमूना-इन-प्रतिक्रिया-आउट सक्षम पार्दै, एकल प्रक्रियामा इंजेक्शन, मिश्रण र प्रतिक्रिया गर्ने कार्यहरू संयोजन गर्दछ।र 18 व्यक्तिगत नियन्त्रणहरू, मानक पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया फ्लोरोसेन्स तीव्रता (पियर्सनको गुणांक > ०.९) सँग राम्रो सम्झौतामा।यस प्रविधिको आधारमा, हामीले 18 इन-नमूना नाक बिरामी नमूनाहरूबाट सबै क्लिनिकल नाक नमूनाहरू विश्लेषण गर्न अभिकर्मक इंजेक्शन, मिश्रण, र प्रतिक्रिया प्रकार्यहरू एकीकृत गर्ने पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया प्रणालीको विकासको पनि वर्णन गर्छौं। इन्फ्लुएन्जा र 18 व्यक्तिगत नियन्त्रणहरू, प्रतिदीप्ति तीव्रता मिलान। राम्रोसँग मानक पोलिमरेज चेन प्रतिक्रिया (पियर्सनको गुणांक > ०.९)।प्रस्तावित प्लेटफर्मले बायोमेडिकल विश्लेषणको भरपर्दो स्वचालनको ग्यारेन्टी दिन्छ र यसरी पोइन्ट-अफ-केयर परीक्षण उपकरणहरूको दायराको व्यावसायीकरणलाई गति दिन सक्छ।
उदीयमान मानव रोगहरू, जस्तै 2020 कोविड-19 महामारी जसले लाखौं मानिसहरूको ज्यान लिइसकेको छ, विश्वव्यापी स्वास्थ्य र मानव सभ्यताको लागि गम्भीर खतरा छ।भाइरसको फैलावटलाई नियन्त्रण गर्न र उपचारका नतिजाहरू सुधार गर्न प्रारम्भिक, छिटो र सही पत्ता लगाउनु महत्त्वपूर्ण छ।केन्द्रीकृत ल्याबहरूमा आधारित कोर डायग्नोस्टिक इकोसिस्टम जहाँ परीक्षण नमूनाहरू अस्पताल वा निदान क्लिनिकहरूमा पठाइन्छ र पेशेवरहरूद्वारा सञ्चालित गरिन्छ, हाल विश्वभरका लगभग 5.8 बिलियन मानिसहरूको पहुँचलाई प्रतिबन्धित गर्दैछ, विशेष गरी संसाधन-प्रतिबन्धित सेटिङहरूमा बस्नेहरू।जहाँ महँगो बायोमेडिकल उपकरण र दक्ष विशेषज्ञको अभाव छ।चिकित्सकहरू 2. यसैले, पोइन्ट-अफ-केयर टेस्टिङ (POCT) क्षमता भएको सस्तो र प्रयोगकर्ता-मैत्री प्रयोगशाला-अन-ए-चिप प्रणाली विकास गर्न तत्काल आवश्यकता छ जसले चिकित्सकहरूलाई सूचित निदान निर्णयहरू गर्न समयमै निदान जानकारी प्रदान गर्न सक्छ। ।र उपचार ३.
विश्व स्वास्थ्य संगठन (WHO) को दिशानिर्देशहरूले बताउँछ कि एक आदर्श POCT किफायती, प्रयोगकर्ता-मैत्री (न्यूनतम प्रशिक्षणको साथ प्रयोग गर्न सजिलो), सही (झूटा नकारात्मक वा गलत सकारात्मकबाट जोगिन), छिटो र भरपर्दो (राम्रो दोहोर्याउने गुणहरू प्रदान गर्नुहोस्), र डेलिभर गर्न मिल्ने (दीर्घकालीन भण्डारण गर्न सक्षम र अन्त प्रयोगकर्ताहरूको लागि सजिलै उपलब्ध) 4।यी आवश्यकताहरू पूरा गर्न, POCT प्रणालीहरूले निम्न सुविधाहरू प्रदान गर्नुपर्छ: म्यानुअल हस्तक्षेप कम गर्न बहुमुखी खुराक, सही परीक्षण नतिजाहरूको लागि अभिकर्मक यातायात मापन गर्न मागमा रिलीज, र वातावरणीय कम्पन सामना गर्न विश्वसनीय प्रदर्शन।हाल, सबैभन्दा व्यापक रूपमा प्रयोग गरिएको POCT उपकरण पार्श्व प्रवाह पट्टी 5,6 हो जसमा छिद्रपूर्ण नाइट्रोसेलुलोज झिल्लीका धेरै तहहरू छन् जसले केशिका बलद्वारा पूर्व-स्थायिकृत अभिकर्मकहरूसँग प्रतिक्रिया गर्दै, नमूनाको धेरै सानो मात्रालाई अगाडि धकेल्छ।यद्यपि तिनीहरूसँग कम लागत, प्रयोगमा सजिलो, र द्रुत परिणामहरूको फाइदा छ, प्रवाह पट्टी-आधारित POCT उपकरणहरू बहु-चरण विश्लेषणहरू आवश्यक बिना जैविक परीक्षणहरू (जस्तै, ग्लुकोज परीक्षण7,8 र गर्भावस्था परीक्षण9,10) को लागि मात्र प्रयोग गर्न सकिन्छ।प्रतिक्रियाहरू (जस्तै बहु अभिकर्मकहरूको लोडिङ, मिक्सिङ, मल्टिप्लेक्सिङ)।थप रूपमा, तरल पदार्थको आन्दोलन (जस्तै, केशिका बलहरू) लाई नियन्त्रण गर्ने ड्राइभिङ फोर्सहरूले राम्रो स्थिरता प्रदान गर्दैन, विशेष गरी ब्याचहरू बीच, नतिजा कमजोर प्रजनन क्षमता 11 र पार्श्व प्रवाह ब्यान्डहरू मुख्य रूपमा राम्रो पत्ता लगाउनका लागि उपयोगी बनाउँछ।
माइक्रो- र नानोस्केलमा विस्तारित उत्पादन क्षमताहरूले मात्रात्मक मापन 14,15,16,17 को लागि माइक्रोफ्लुइडिक POCT उपकरणहरूको विकासको लागि अवसरहरू सिर्जना गरेको छ।इन्टरफेस 18, 19 र च्यानलहरूको ज्यामिति 20, 21, 22 को गुणहरू समायोजन गरेर, यी उपकरणहरूको केशिका बल र प्रवाह दर नियन्त्रण गर्न सकिन्छ।यद्यपि, तिनीहरूको विश्वसनीयता, विशेष गरी अत्यधिक गीला तरल पदार्थहरूको लागि, निर्माण त्रुटिहरू, सामग्री दोषहरू, र वातावरणीय कम्पनहरूको संवेदनशीलताको कारणले अस्वीकार्य रहन्छ।थप रूपमा, तरल-ग्यास इन्टरफेसमा केशिका प्रवाह सिर्जना भएकोले, कुनै अतिरिक्त प्रवाह पेश गर्न सकिँदैन, विशेष गरी तरलले माइक्रोफ्लुइडिक च्यानल भरेपछि।त्यसकारण, थप जटिल पत्ता लगाउनको लागि, नमूना इंजेक्शनको धेरै चरणहरू 24,25 प्रदर्शन गर्नुपर्छ।
माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणहरू मध्ये, केन्द्रापसारक माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणहरू हाल POCT26,27 को लागि उत्तम समाधानहरू मध्ये एक हो।यसको ड्राइभ मेकानिजम लाभदायक छ कि ड्राइभिङ फोर्स घुमाउने गति समायोजन गरेर नियन्त्रण गर्न सकिन्छ।यद्यपि, बेफाइदा यो हो कि केन्द्रापसारक बल सधैं यन्त्रको बाहिरी किनारा तिर निर्देशित हुन्छ, यसले थप जटिल विश्लेषणहरूको लागि आवश्यक बहु-चरण प्रतिक्रियाहरू लागू गर्न गाह्रो बनाउँछ।यद्यपि अतिरिक्त ड्राइभिङ फोर्सहरू (जस्तै केशिकाहरू 28, 29 र धेरै अन्य 30, 31, 32, 33, 34, 35) केन्द्रापसारक बलको अतिरिक्त बहु-कार्यात्मक खुराकको लागि पेश गरिएको छ, अप्रत्याशित तरल स्थानान्तरण अझै पनि हुन सक्छ किनभने यी अतिरिक्त बलहरू सामान्यतया आदेशहरू हुन्। सेन्ट्रीफ्यूगल बल भन्दा कम परिमाणको, तिनीहरूलाई साना अपरेटिङ दायराहरूमा मात्र प्रभावकारी बनाउँछ वा तरल रिलिज संग माग मा उपलब्ध छैन।सेन्ट्रीफ्यूगल माइक्रोफ्लुइडिक्समा वायवीय हेरफेरहरू समावेश गर्दै सेन्ट्रीफ्यूगल काइनेटिक विधिहरू 36, 37, 38, थर्मोप्न्यूमेटिक विधिहरू 39 र सक्रिय वायवीय विधिहरू 40 एक आकर्षक विकल्प साबित भएको छ।काउन्टरफुगोडायनामिक दृष्टिकोणको साथ, बाह्य र आन्तरिक कार्यको लागि अतिरिक्त गुहा र जडान माइक्रो च्यानलहरू उपकरणमा एकीकृत हुन्छन्, यद्यपि यसको पम्पिङ दक्षता (७५% देखि ९०% सम्मको दायरामा) पम्पिङ चक्रको संख्या र चिपचिपापनमा अत्यधिक निर्भर हुन्छ। तरल को।थर्मोप्न्यूमेटिक विधिमा, लेटेक्स झिल्ली र तरल स्थानान्तरण कक्ष विशेष रूपमा इनलेटलाई सील गर्न वा पुन: खोल्नको लागि डिजाइन गरिएको हो जब फँसिएको हावाको मात्रा तातो वा चिसो हुन्छ।यद्यपि, तताउने/कूलिङ सेटअपले ढिलो प्रतिक्रिया समस्याहरू प्रस्तुत गर्दछ र थर्मोसेन्सिटिभ एसेसहरूमा यसको प्रयोगलाई सीमित गर्दछ (जस्तै, पोलिमरेज चेन रियाक्सन (PCR) प्रवर्धन)।एक सक्रिय वायमेटिक दृष्टिकोणको साथ, मागमा रिलिज र भित्री आन्दोलन सकारात्मक दबाबको एक साथ आवेदन र उच्च-गति मोटरहरू द्वारा सटीक रूपमा मिल्दो रोटेशनल गति मार्फत हासिल गरिन्छ।त्यहाँ केवल वायवीय एक्चुएटरहरू (सकारात्मक दबाव 41, 42 वा नकारात्मक दबाव 43) र सामान्यतया बन्द भल्भ डिजाइनहरू प्रयोग गरेर अन्य सफल दृष्टिकोणहरू छन्।वायमेटिक चेम्बरमा क्रमिक रूपमा दबाब लागू गरेर, तरललाई पेरिस्टाल्टिक रूपमा अगाडि पम्प गरिन्छ, र सामान्यतया बन्द भल्भले पेरिस्टालिसिसको कारणले तरल पदार्थको ब्याकफ्लोलाई रोक्छ, यसरी जटिल तरल कार्यहरू महसुस गर्दछ।यद्यपि, त्यहाँ हाल सीमित संख्यामा मात्र माइक्रोफ्लुइडिक प्रविधिहरू छन् जसले एकल POCT यन्त्रमा जटिल तरल कार्यहरू गर्न सक्छन्, जसमा बहु-कार्यात्मक वितरण, मागमा रिलीज, भरपर्दो कार्यसम्पादन, दीर्घकालीन भण्डारण, उच्च चिपचिपापन तरल पदार्थहरूको ह्यान्डलिङ, र लागत-प्रभावी उत्पादन।सबै एकै समयमा।बहु-चरण कार्यात्मक सञ्चालनको अभाव पनि एक कारण हुन सक्छ किनकी केहि व्यावसायिक POCT उत्पादनहरू जस्तै सेफिड, बिन्क्स, भिस्बी, कोबास लिट, र रोन्डाहरू आजसम्म खुल्ला बजारमा सफलतापूर्वक प्रस्तुत गरिएको छ।
यस पेपरमा, हामी हरियो रिंग माइक्रो स्विच टेक्नोलोजी (FAST) मा आधारित वायमेटिक माइक्रोफ्लुइडिक एक्टुएटर प्रस्ताव गर्दछौं।FAST ले माइक्रोलाइटरदेखि मिलिलिटरसम्म अभिकर्मकहरूको विस्तृत दायराको लागि एकै समयमा सबै आवश्यक गुणहरू संयोजन गर्दछ।फास्टमा लोचदार झिल्ली, लिभर र ब्लकहरू हुन्छन्।हावाको चापको प्रयोग बिना, झिल्ली, लिभर र ब्लकहरू कडा रूपमा बन्द गर्न सकिन्छ र तरल पदार्थ लामो समयको लागि भण्डारण गर्न सकिन्छ।जब उपयुक्त दबाब लागू गरिन्छ र लीभरको लम्बाइमा समायोजन गरिन्छ, डायाफ्राम विस्तार हुन्छ र लीभरलाई खुला स्थानमा धकेल्छ, तरल पदार्थ पास गर्न अनुमति दिन्छ।यसले तरल पदार्थको बहु-कार्यात्मक मिटरिङलाई क्यास्केड, एकसाथ, क्रमिक वा चयनात्मक रूपमा अनुमति दिन्छ।
हामीले इन्फ्लुएन्जा A र B भाइरसहरू (IAV र IBV) पत्ता लगाउनको लागि नमूना-मा-प्रतिक्रिया परिणामहरू उत्पन्न गर्न FAST प्रयोग गरेर PCR प्रणाली विकास गरेका छौं।हामीले 102 प्रतिलिपिहरू/mL को पहिचानको तल्लो सीमा (LOD) हासिल गर्‍यौं, हाम्रो मल्टिप्लेक्स परखले IAV र IBV को लागि विशिष्टता देखायो र इन्फ्लुएन्जा भाइरस प्याथोटाइपिङलाई अनुमति दियो।18 बिरामीहरू र 18 स्वस्थ व्यक्तिहरूबाट नाक स्वाब नमूना प्रयोग गरेर क्लिनिकल परीक्षण परिणामहरूले मानक RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रतामा राम्रो सहमति देखाउँदछ।18 बिरामीहरू र 18 स्वस्थ व्यक्तिहरूबाट नाक स्वाब नमूना प्रयोग गरेर क्लिनिकल परीक्षण परिणामहरूले मानक RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रतामा राम्रो सहमति देखाउँदछ।Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лиц показатевых нсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > ०,९)।18 बिरामीहरू र 18 स्वस्थ व्यक्तिहरूबाट नाक स्वाब नमूना प्रयोग गरेर क्लिनिकल परीक्षणहरूको नतिजाले मानक RT-PCR (Pearson's coefficients> 0.9) को फ्लोरोसेन्स तीव्रता बीच राम्रो सम्झौता देखाउँदछ।०.९) ........................... Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоровых лица пациентов ду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэфициент Пирсона > ०,९)।18 बिरामीहरू र 18 स्वस्थ व्यक्तिहरूबाट नाक स्वाब नमूनाहरू प्रयोग गरेर क्लिनिकल परीक्षणहरूको नतिजाले फ्लोरोसेन्स तीव्रता र मानक RT-PCR (Pearson's coefficient> 0.9) बीच राम्रो सम्झौता देखायो।FAST-POCT यन्त्रको अनुमानित सामग्री लागत लगभग US$ 1 (पूरक तालिका 1) छ र यसलाई ठूलो मात्रामा उत्पादन विधिहरू (जस्तै इंजेक्शन मोल्डिङ) प्रयोग गरेर घटाउन सकिन्छ।वास्तवमा, FAST-आधारित POCT यन्त्रहरूमा WHO द्वारा अनिवार्य गरिएका सबै आवश्यक सुविधाहरू छन् र नयाँ बायोकेमिकल परीक्षण विधिहरू जस्तै प्लाज्मा थर्मल साइक्लिङ ४४, एम्प्लीफिकेशन-फ्री इम्युनोअसेस ४५ र नानोबडी फंक्शनलाइजेसन टेस्ट ४६सँग मिल्दोजुल्दो छन् जुन POCT प्रणालीहरूको मेरुदण्ड हो।सम्भावना।
अंजीर मा।1a ले FAST-POCT प्लेटफर्मको संरचना देखाउँछ, जसमा चार तरल कक्षहरू हुन्छन्: एक पूर्व भण्डारण कक्ष, एक मिश्रण कक्ष, एक प्रतिक्रिया कक्ष, र एक अपशिष्ट कक्ष।तरल प्रवाह नियन्त्रणको कुञ्जी पूर्व-भण्डारण कक्ष र मिक्सिङ चेम्बरमा अवस्थित FAST डिजाइन (लोचदार झिल्ली, लिभर र ब्लकहरू मिलेर) हो।वायवीय रूपमा सक्रिय विधिको रूपमा, FAST डिजाइनले बन्द/खुला स्विचिङ, बहुमुखी डोजिङ, अन-डिमान्ड फ्लुइड रिलिज, भरपर्दो सञ्चालन (जस्तै, वातावरणीय कम्पनप्रति असंवेदनशीलता), र दीर्घकालीन भण्डारण सहित सटीक तरल प्रवाह नियन्त्रण प्रदान गर्दछ।FAST-POCT प्लेटफर्ममा चार तहहरू हुन्छन्: ब्याकिङ लेयर, इलास्टिक फिल्म लेयर, प्लास्टिक फिलिम लेयर, र कभर लेयर, जसरी चित्र 1b मा विस्तारित दृश्यमा देखाइएको छ (पूरक फिगर S1 र S2 मा विस्तृत रूपमा देखाइएको छ। )।सबै च्यानलहरू र तरल परिवहन कक्षहरू (जस्तै पूर्व भण्डारण र प्रतिक्रिया कक्षहरू) PLA (पोलिलैक्टिक एसिड) सब्सट्रेटहरूमा 0.2 मिमी (सबैभन्दा पातलो भाग) देखि 5 मिमी बाक्लो सम्म सम्मिलित हुन्छन्।लोचदार फिल्म सामग्री 300 µm बाक्लो PDMS हो जुन यसको "पातलो मोटाई" र लोचको कम मोड्युलस (लगभग 2.25 MPa47) को कारणले हावाको दबाब लागू गर्दा सजिलै विस्तार हुन्छ।हावाको चापको कारणले लोचदार फिल्मलाई अत्यधिक विकृतिबाट बचाउनको लागि 100 µm को मोटाईको पोलिथीन फिलिम लेयर पोलिथिन टेरेफ्थालेट (PET) बाट बनेको हुन्छ।चेम्बरहरूसँग मिल्दोजुल्दो, सब्सट्रेट तहमा तरल पदार्थको प्रवाहलाई नियन्त्रण गर्न कभर तह (PLA बाट बनेको) मा जडान गरिएको लीभरहरू छन्।लोचदार फिल्मलाई दोहोरो पक्षीय चिपकने टेप (ARseal 90880) प्रयोग गरेर ब्याकिङ लेयरमा टाँसिएको थियो र प्लास्टिकको फिल्मले ढाकिएको थियो।कभर तहमा टी-क्लिप डिजाइन प्रयोग गरेर सब्सट्रेटमा तीन तहहरू भेला भएका थिए।T-clamp मा दुई खुट्टा बीचको खाडल छ।जब क्लिप नालीमा घुसाइयो, दुई खुट्टा थोरै झुक्यो, त्यसपछि आफ्नो मूल अवस्थामा फर्कियो र ढक्कन र ब्याकिङलाई कडा रूपमा बाँधियो जब तिनीहरू नालीबाट गुज्र्छन् (पूरक चित्र। S1)।चार तहहरू त्यसपछि कनेक्टरहरू प्रयोग गरेर भेला हुन्छन्।
FAST को विभिन्न कार्यात्मक डिब्बाहरू र सुविधाहरू चित्रण गर्ने प्लेटफर्मको योजनाबद्ध रेखाचित्र।b FAST-POCT प्लेटफर्मको विस्तारित रेखाचित्र।c अमेरिकी डलरको सिक्काको छेउमा रहेको प्लेटफर्मको फोटो।
FAST-POCT प्लेटफर्मको काम गर्ने संयन्त्र चित्र २ मा देखाइएको छ। मुख्य कम्पोनेन्टहरू आधार तहमा रहेका ब्लकहरू र कभर तहमा रहेका टिकाहरू हुन्, जसले चार तहहरूलाई T-आकार प्रयोग गरी जम्मा गर्दा हस्तक्षेप डिजाइनमा परिणाम दिन्छ। ।जब कुनै हावाको दबाब लागू हुँदैन (fig. 2a), हस्तक्षेप फिटले काजलाई झुकाउन र विकृत बनाउँछ, र ब्लकको बिरूद्ध लोचदार फिल्म थिच्न लिभर मार्फत सील बल लागू गरिन्छ, र सिल गुहामा तरल परिभाषित गरिन्छ। सिल गरिएको राज्यको रूपमा।यो ध्यान दिनुपर्छ कि यस अवस्थामा, लीभर बाहिरीतिर झुकिएको छ, चित्र 2a मा साइड दृश्यमा देखाइएको छ।जब हावा आपूर्ति गरिन्छ (चित्र 2b), लोचदार झिल्ली कभर तिर बाहिरी रूपमा फैलिन्छ र लीभरलाई माथि धकेल्छ, यसरी अर्को च्याम्बरमा तरल पदार्थ प्रवाहको लागि लीभर र ब्लक बीचको खाडल खोल्छ, जुन खुला अवस्थाको रूपमा परिभाषित गरिएको छ। ।हावाको दबाबको रिलीज पछि, लीभर आफ्नो मूल स्थितिमा फर्कन सक्छ र काजको लोचको कारणले कडा रहन सक्छ।लिभर आन्दोलनका भिडियोहरू पूरक चलचित्र S1 मा प्रस्तुत गरिएका छन्।
A. बन्द हुँदा योजनाबद्ध रेखाचित्र र फोटोहरू।दबाबको अभावमा, लीभरले ब्लक विरुद्ध झिल्ली थिच्छ, र तरल बन्द छ।b राम्रो अवस्थामा।जब दबाब लागू हुन्छ, झिल्ली विस्तार हुन्छ र लीभर माथि धकेल्छ, त्यसैले च्यानल खुल्छ र तरल पदार्थ प्रवाह गर्न सक्छ।c महत्वपूर्ण दबाबको विशेषता आकार निर्धारण गर्नुहोस्।विशेषता आयामहरूले लीभरको लम्बाइ (L), स्लाइडर र काज (l) बीचको दूरी र लीभर प्रोट्रुसन (t) को मोटाई समावेश गर्दछ।Fs थ्रोटल बिन्दु B मा कम्प्याक्शन बल हो। q लीभरमा समान रूपमा वितरित लोड हो।Tx* ले हिङ्ग्ड लिभर द्वारा विकसित टर्क प्रतिनिधित्व गर्दछ।क्रिटिकल प्रेसर भनेको लिभर उठाउन र तरल पदार्थ प्रवाह गर्न आवश्यक पर्ने दबाब हो।d महत्वपूर्ण दबाव र तत्व आकार बीचको सम्बन्धको सैद्धान्तिक र प्रयोगात्मक परिणामहरू।n = 6 स्वतन्त्र प्रयोगहरू प्रदर्शन गरियो र डेटा ± मानक विचलनको रूपमा देखाइयो।कच्चा डाटा कच्चा डाटा फाइल रूपमा प्रस्तुत गरिन्छ।
बीम सिद्धान्तमा आधारित एक विश्लेषणात्मक मोडेल क्रिटिकल प्रेसर पीसीको निर्भरता विश्लेषण गर्न विकसित गरिएको छ जसमा ज्यामितीय मापदण्डहरूमा ग्याप खुल्छ (उदाहरणका लागि, एल लिभरको लम्बाइ हो, l ब्लक र बीचको दूरी हो। काज, S लिभर हो तरल t संग सम्पर्क क्षेत्र लीभर प्रोट्रुसन को मोटाई हो, चित्र 2c मा देखाइएको छ)।पूरक नोटहरू र पूरक चित्र S3 मा विस्तृत रूपमा, ग्याप खुल्छ जब \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), जहाँ Fs टर्क हो। \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) हस्तक्षेप फिटसँग सम्बन्धित बलहरू हटाउन र काजलाई झुकाउनको लागि।प्रायोगिक प्रतिक्रिया र विश्लेषणात्मक मोडेलले राम्रो सम्झौता (चित्र 2d) देखाउँछ, देखाउँछ कि महत्वपूर्ण दबाब पीसी बढ्दो t/l र घट्दै L संग बढ्छ, जुन क्लासिकल बीम मोडेलद्वारा सजिलै व्याख्या गरिएको छ, अर्थात् t/Lift सँग टर्क बढ्छ। ।तसर्थ, हाम्रो सैद्धान्तिक विश्लेषणले स्पष्ट रूपमा देखाउँछ कि महत्वपूर्ण दबावलाई प्रभावकारी रूपमा लीभर लम्बाइ L र t/l अनुपात समायोजन गरेर नियन्त्रण गर्न सकिन्छ, जसले FAST-POCT प्लेटफर्मको डिजाइनको लागि महत्त्वपूर्ण आधार प्रदान गर्दछ।
FAST-POCT प्लेटफर्मले बहु-कार्यात्मक वितरण (इनसेट र प्रयोगको साथ चित्र 3a मा देखाइएको) प्रदान गर्दछ, जुन सफल POCT को सबैभन्दा महत्त्वपूर्ण विशेषता हो, जहाँ तरल पदार्थ कुनै पनि दिशा र कुनै पनि क्रममा (क्यास्केड, एक साथ, अनुक्रमिक) वा चयनात्मक मल्टिच्यानल प्रवाह गर्न सकिन्छ। वितरण।- खुराक समारोह।अंजीर मा।3a(i) ले एक क्यास्केडेड डोजिङ मोड देखाउँछ जसमा दुई वा बढी चेम्बरहरू ब्लकहरू प्रयोग गरेर विभिन्न रिएक्टेन्टहरू र खुला र बन्द अवस्थाहरू नियन्त्रण गर्न एक लीभरलाई अलग गर्न प्रयोग गरिन्छ।जब दबाब लागू गरिन्छ, तरल माथिबाट तल्लो कक्षमा क्यास्केड तरिकामा प्रवाह हुन्छ।यो ध्यान दिनुपर्छ कि क्यास्केड कक्षहरू भिजेको रसायन वा सुक्खा रसायनहरू जस्तै lyophilized पाउडर भर्न सकिन्छ।चित्र 3a(i) को प्रयोगमा, माथिल्लो कक्षबाट रातो मसी निलो डाई पाउडर (तामा सल्फेट) सँगसँगै दोस्रो कक्षमा बग्छ र तल्लो कक्षमा पुग्दा गाढा निलो हुन्छ।यसले पम्प भइरहेको तरल पदार्थको लागि नियन्त्रण दबाव पनि देखाउँछ।त्यसै गरी, जब एउटा लीभर दुई च्याम्बरहरूमा जडान हुन्छ, यो एक साथ इन्जेक्सन मोड बन्छ, जस्तै चित्रमा देखाइएको छ।3a(ii), जसमा दबाब लागू गर्दा तरल पदार्थ दुई वा बढी कक्षहरूमा समान रूपमा वितरण गर्न सकिन्छ।चूंकि महत्वपूर्ण दबाब लीभरको लम्बाइमा निर्भर गर्दछ, लीभरको लम्बाइलाई चित्रमा देखाइएको अनुक्रमिक इंजेक्शन ढाँचा प्राप्त गर्न समायोजन गर्न सकिन्छ।3a(iii)।एउटा लामो लिभर (महत्वपूर्ण दबाबको साथ Pc_long) चेम्बर B मा जडान गरिएको थियो र छोटो लिभर (महत्वपूर्ण दबाब Pc_short > Pc_long सँग) चेम्बर A मा जडान गरिएको थियो। दबाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू गरिएको थियो, रातो तरल मात्र। च्याम्बर B मा प्रवाह गर्न सक्छ र जब दबाब P2 (> Pc_short) मा बढाइयो, नीलो तरल चेम्बर A मा प्रवाह गर्न सक्छ। यो अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड क्रमबद्ध रूपमा तिनीहरूको सम्बन्धित कक्षहरूमा स्थानान्तरण गर्ने विभिन्न तरलहरूमा लागू हुन्छ, जुन सफल POCT को लागि महत्वपूर्ण छ। उपकरण।एउटा लामो लिभर (महत्वपूर्ण दबाबको साथ Pc_long) चेम्बर B मा जडान गरिएको थियो र छोटो लिभर (महत्वपूर्ण दबाब Pc_short > Pc_long सँग) चेम्बर A मा जडान गरिएको थियो। दबाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू गरिएको थियो, रातो तरल मात्र। च्याम्बर B मा प्रवाह गर्न सक्छ र जब दबाब P2 (> Pc_short) मा बढाइयो, नीलो तरल चेम्बर A मा प्रवाह गर्न सक्छ। यो अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड क्रमबद्ध रूपमा तिनीहरूको सम्बन्धित कक्षहरूमा स्थानान्तरण गर्ने विभिन्न तरलहरूमा लागू हुन्छ, जुन सफल POCT को लागि महत्वपूर्ण छ। उपकरण।Длинный рычаг (с критическим давлением पीसी_लांग) с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь в CAMERU B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру A я к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающее значение дл.एउटा लामो लिभर (महत्वपूर्ण दबाबको साथ Pc_long) चेम्बर B मा जडान गरिएको थियो, र छोटो लिभर (महत्वपूर्ण दबाव Pc_short > Pc_long सँग) चेम्बर A मा जडान गरिएको थियो। जब दबाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू गरिन्छ, तरल मात्र हाइलाइट हुन्छ। रातो रङमा चेम्बर B मा प्रवाह हुन सक्छ, र जब दबाब P2 (> Pc_short) मा बढाइएको छ, नीलो तरल चेम्बर A मा प्रवाह गर्न सक्छ। यो अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड क्रमिक रूपमा सम्बन्धित चेम्बरहरूमा स्थानान्तरण गरिएका विभिन्न तरल पदार्थहरूमा लागू गरिन्छ, जुन महत्त्वपूर्ण छ। सफल POCT को लागी।उपकरण। Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_short) > Pc_long.लामो हात (क्रिटिकल प्रेसर Pc_long) चेम्बर B मा जोडिएको छ र छोटो हात (क्रिटिकल प्रेसर Pc_short > Pc_long) चेम्बर A मा जोडिएको छ।При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) एक मोजेट पोस्टुप्याट सिनियाया जिडकोस्ति।जब दबाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) लागू गरिन्छ, केवल रातो तरलले च्याम्बर B मा प्रवेश गर्न सक्छ, र जब दबाब P2 (> Pc_short) मा बढाइन्छ, नीलो तरल चेम्बर A मा प्रवेश गर्न सक्छ। यो अनुक्रमिक इंजेक्शन मोड क्रमिक स्थानान्तरणको लागि उपयुक्त छ। सम्बन्धित कक्षहरूमा विभिन्न तरल पदार्थहरू, जुन POCT उपकरणको सफल सञ्चालनको लागि महत्वपूर्ण छ।चित्र 3a(iv) ले चयनात्मक इंजेक्शन मोड प्रदर्शन गर्दछ, जहाँ मुख्य चेम्बरमा छोटो (महत्वपूर्ण दबाव Pc_short संग) र लामो लिभर (महत्वपूर्ण दबाव Pc_long < Pc_short संग) थियो जुन क्रमशः चेम्बर A र चेम्बर B मा जोडिएको थियो। चेम्बर B मा जडान भएको अर्को एयर च्यानलमा। तरल पदार्थलाई च्याम्बर A मा स्थानान्तरण गर्न पहिले, दबाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) र P2 (P2 > P1) P1 + P2 > Pc_short सँग एकै समयमा यन्त्रमा लागू गरियो।चित्र 3a(iv) ले चयनात्मक इंजेक्शन मोड प्रदर्शन गर्दछ, जहाँ मुख्य चेम्बरमा छोटो (महत्वपूर्ण दबाव Pc_short संग) र लामो लिभर (महत्वपूर्ण दबाव Pc_long < Pc_short संग) थियो जुन क्रमशः चेम्बर A र चेम्बर B मा जोडिएको थियो। चेम्बर B मा जडान भएको अर्को एयर च्यानलमा। तरल पदार्थलाई च्याम्बर A मा स्थानान्तरण गर्न पहिले, दबाब P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) र P2 (P2 > P1) P1 + P2 > Pc_short सँग एकै समयमा यन्त्रमा लागू गरियो।अंजीर मा।3a(iv) показан режим селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическим давлением Pc_short) давлением Pc_long < Pc_short), которые дополнительно соединялись с камерой A и камерой B соответственно।3a(iv) ले चयनात्मक इंजेक्शन मोड देखाउँछ, जसमा मुख्य चेम्बरमा छोटो (महत्वपूर्ण दबाव Pc_short संग) र लामो लिभर (महत्वपूर्ण दबाव Pc_long < Pc_short संग) थियो, जुन क्रमशः चेम्बर A र चेम्बर B मा जोडिएको थियो।к другому воздушному каналу, соединенному с камерой B (Pc_long < P1 < Pc_short) र P2 (P2 > P1), где P1 + P2 > Pc_short।चेम्बर B मा जडान भएको अर्को वायु च्यानलमा। पहिले चेम्बर A मा तरल पदार्थ स्थानान्तरण गर्न, P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) र P2 (P2 > P1) लाई एकैसाथ यन्त्रमा लागू गरियो, जहाँ P1 + P2 > Pc_short। 3a (iv) показан режим селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим давлением давлением давлением) Pc тическим давлением Pc_long < Pc_short), соединенные с камерой A र cameroy B соответственно, и в дополнение к другомудукамука подключенному к комнате B3a(iv) ले चयनात्मक इंजेक्शन मोड देखाउँदछ जब मुख्य चेम्बरमा छोटो स्टेम (क्रिटिकल प्रेसर Pc_short) र लामो स्टेम (क्रिटिकल प्रेसर Pc_long < Pc_short) क्रमशः चेम्बर A र चेम्बर B मा जोडिएको हुन्छ, र अर्को हावा मार्गको अतिरिक्त, कोठा B मा जोडिएको.यसरी, P2 ले तरललाई चेम्बर B मा प्रवेश गर्नबाट रोक्छ;यस बीचमा, कुल दबाब P1 + P2 ले चेम्बर A मा तरल प्रवाहलाई अनुमति दिनको लागि चेम्बर A मा जडान गरिएको छोटो लिभर सक्रिय गर्नको लागि महत्वपूर्ण दबाब नाघ्यो। त्यसपछि, जब चेम्बर B भर्न आवश्यक थियो, हामीले P1 (Pc_long <) मात्र लागू गर्न आवश्यक छ। P1 < Pc_short) मुख्य चेम्बरमा लामो लिभर सक्रिय गर्न र तरल पदार्थलाई चेम्बर B मा प्रवाह गर्न अनुमति दिनुहोस्। यो समय t = 3 s देखि 9 s सम्म स्पष्ट रूपमा देख्न सकिन्छ कि चेम्बर A मा तरल स्थिर रह्यो जबकि यो चेम्बरमा बढ्यो। B जब दबाब P1 लागू गरियो।यस बीचमा, कुल दबाब P1 + P2 ले चेम्बर A मा तरल प्रवाहलाई अनुमति दिनको लागि चेम्बर A मा जडान गरिएको छोटो लिभर सक्रिय गर्नको लागि महत्वपूर्ण दबाब नाघ्यो। त्यसपछि, जब चेम्बर B भर्न आवश्यक थियो, हामीले P1 (Pc_long <) मात्र लागू गर्न आवश्यक छ। P1 < Pc_short) मुख्य चेम्बरमा लामो लिभर सक्रिय गर्न र तरल पदार्थलाई चेम्बर B मा प्रवाह गर्न अनुमति दिनुहोस्। यो समय t = 3 s देखि 9 s सम्म स्पष्ट रूपमा देख्न सकिन्छ कि चेम्बर A मा तरल स्थिर रह्यो जबकि यो चेम्बरमा बढ्यो। B जब दबाब P1 लागू गरियो।Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать более короткий рычаг, сноевказмой рычаг лить жидкости течь в камеру A। ) मा дкость в камере एक оставалась постоянной, в то время как в камере она увеличивалась।यस बीचमा, कुल दबाब P1 + P2 ले चेम्बर A मा तरल पदार्थ प्रवाह गर्न अनुमति दिनको लागि चेम्बर A मा जडान गरिएको छोटो लिभर सक्रिय गर्न महत्वपूर्ण दबाबलाई नाघ्यो। त्यसपछि जब चेम्बर B भर्न आवश्यक छ, हामीले P1 (Pc_long < P1) मात्र लागू गर्न आवश्यक छ। < Pc_short ) मुख्य चेम्बरमा लामो लिभर सक्रिय गर्न र तरल पदार्थलाई चेम्बर B मा प्रवाह गर्न दिनुहोस्। यो स्पष्ट रूपमा देख्न सकिन्छ कि t = 3 s र 9 s बीचमा चेम्बर A मा तरल स्थिर रह्यो, जबकि चेम्बरमा यो बढ्यो।B जब दबाब P1 लागू हुन्छ।एकै समयमा, कुल दबाब P1 + P2 ले महत्वपूर्ण दबाब भन्दा बढि छ, छोटो लीभर जडान गर्ने च्याम्बर A लाई सक्रिय गर्दै, तरल पदार्थलाई च्याम्बर A मा प्रवाह गर्न अनुमति दिन्छ।जब यो च्याम्बर A भर्ने समय हो, हामी केवल P1 लाई मुख्य चेम्बरमा र P2 को माध्यमिक कक्षमा लागू गर्छौं।यस तरिकाले, प्रवाह व्यवहारलाई क्यामेरा A र B बीच चयन रूपमा स्विच गर्न सकिन्छ। चार बहु-कार्यात्मक वितरण मोडहरूको प्रवाह व्यवहार पूरक चलचित्र S2 मा फेला पार्न सकिन्छ।
बहुकार्यात्मक असाइनमेन्टको दृष्टान्त, अर्थात् (i) क्यास्केडिङ, (ii) एक साथ, (iii) क्रमिक, र (iv) चयनात्मक असाइनमेन्ट।कर्भहरूले यी चार वितरण मोडहरूको कार्यप्रवाह र प्यारामिटरहरू प्रतिनिधित्व गर्दछ।b deionized पानी र इथेनॉलमा दीर्घकालीन भण्डारण परीक्षणको नतिजा।n = 5 स्वतन्त्र प्रयोगहरू प्रदर्शन गरियो र डेटा ± sd c को रूपमा देखाइयो।FAST उपकरण र केशिका भल्भ (CV) उपकरण (i) स्थिर र (ii) कम्पन अवस्थाहरूमा हुँदा स्थिरता परीक्षण प्रदर्शनहरू।(iii) विभिन्न कोणीय फ्रिक्वेन्सीहरूमा FAST र CV यन्त्रहरूको लागि भोल्युम बनाम समय।d (i) FAST उपकरण र (ii) CV उपकरणको मागमा परीक्षण परिणामहरूको प्रकाशन।(iii) FAST र CV यन्त्रहरू बीचको भोल्युम र समय बीचको सम्बन्ध अन्तरिम दबाव मोड प्रयोग गरेर।सबै स्केल बारहरू, 1 सेमी।कच्चा डाटा कच्चा डाटा फाइल रूपमा प्रदान गरिन्छ।
अभिकर्मकहरूको लामो-समय भण्डारण सफल POCT उपकरणको अर्को महत्त्वपूर्ण विशेषता हो जसले अप्रशिक्षित कर्मचारीहरूलाई धेरै अभिकर्मकहरू ह्यान्डल गर्न अनुमति दिन्छ।जबकि धेरै प्रविधिहरूले दीर्घकालीन भण्डारणको लागि आफ्नो क्षमता देखाएको छ (जस्तै, 35 माइक्रोडिस्पेन्सरहरू, 48 ब्लिस्टर प्याकहरू, र 49 स्टिक प्याकहरू), प्याकेज समायोजन गर्न एक समर्पित प्राप्त डिब्बा आवश्यक छ, जसले लागत र जटिलता बढाउँछ;यसबाहेक, यी भण्डारण संयन्त्रहरूले मागमा वितरणको लागि अनुमति दिँदैन र प्याकेजिङ्गमा बाँकी रहेका कारण अभिकर्मकहरूको बर्बादी हुन्छ।दीर्घकालीन भण्डारण क्षमता यसको अलिकति नरमपन र ग्यास प्रवेश (पूरक चित्र S5) को प्रतिरोधको कारण CNC-मशिन PMMA सामग्री प्रयोग गरेर एक द्रुत जीवन परीक्षण सञ्चालन गरेर प्रमाणित गरियो।परीक्षण उपकरण 9 दिनको लागि 65 डिग्री सेल्सियसमा विआयनीकृत पानी (विआयनीकृत पानी) र 70% इथेनॉल (सिमुलेटिंग वाष्पशील अभिकर्मक) भरिएको थियो।माथिबाट पहुँच रोक्न एल्युमिनियम पन्नी प्रयोग गरेर डियोनाइज्ड पानी र इथेनॉल दुवै भण्डारण गरिएको थियो।साहित्यमा रिपोर्ट गरिएको Arrhenius समीकरण र प्रवेश सक्रियता ऊर्जा 50,51 वास्तविक-समय बराबर गणना गर्न प्रयोग गरिएको थियो।अंजीर मा।3b ले 9 दिनको लागि 65°C मा भण्डारण गरिएका 5 नमूनाहरूको औसत तौल घटाउने नतिजाहरू देखाउँछ, 0.30% डियोनाइज्ड पानीको लागि र 0.72% 70% इथेनॉलको लागि 23°C मा 2 वर्षसम्म।
अंजीर मा।3c ले कम्पन परीक्षण देखाउँछ।अवस्थित POCT28,29 यन्त्रहरूमा केशिका भल्भ (CV) सबैभन्दा लोकप्रिय तरल पदार्थ ह्यान्डलिङ विधि भएको हुनाले, तुलनाका लागि CV यन्त्र ३०० µm चौडा र २०० µm गहिरो प्रयोग गरिएको थियो।यो देख्न सकिन्छ कि जब दुबै यन्त्रहरू स्थिर रहन्छन्, FAST-POCT प्लेटफर्म सिलमा तरल पदार्थ र CV उपकरणमा फ्लुइड च्यानलको अचानक विस्तारको कारणले लक हुन्छ, जसले केशिका बलहरू कम गर्दछ।यद्यपि, अर्बिटल भाइब्रेटरको कोणीय फ्रिक्वेन्सी बढ्दै जाँदा, FAST-POCT प्लेटफर्ममा तरल पदार्थ बन्द रहन्छ, तर CV उपकरणमा तरल पदार्थ तल्लो चेम्बरमा बग्छ (सप्लिमेन्टरी चलचित्र S3 पनि हेर्नुहोस्)।यसले सुझाव दिन्छ कि FAST-POCT प्लेटफर्मको विकृत हिंगहरूले च्याम्बरमा तरल पदार्थलाई कडा रूपमा बन्द गर्न मोड्युलमा बलियो मेकानिकल बल लागू गर्न सक्छ।यद्यपि, CV यन्त्रहरूमा, ठोस, हावा, र तरल चरणहरू बीचको सन्तुलनको कारणले तरल पदार्थ राखिन्छ, अस्थिरता सिर्जना गर्दछ, र कम्पनहरूले सन्तुलन बिग्रन्छ र अप्रत्याशित प्रवाह व्यवहार निम्त्याउन सक्छ।FAST-POCT प्लेटफर्मको फाइदा यो हो कि यसले भरपर्दो कार्यक्षमता प्रदान गर्दछ र कम्पनहरूको उपस्थितिमा विफलताहरूलाई बेवास्ता गर्दछ जुन सामान्यतया डेलिभरी र सञ्चालनको क्रममा हुन्छ।
FAST-POCT प्लेटफर्मको अर्को महत्त्वपूर्ण विशेषता भनेको यसको अन-डिमांड रिलीज हो, जुन मात्रात्मक विश्लेषणको लागि मुख्य आवश्यकता हो।अंजीर मा।3d ले FAST-POCT प्लेटफर्म र CV यन्त्रको अन-डिमान्ड रिलीजलाई तुलना गर्छ।अंजीरबाट।3d(iii) हामीले देख्छौं कि FAST उपकरणले चाँडै दबाव संकेतमा प्रतिक्रिया दिन्छ।जब FAST-POCT प्लेटफर्ममा दबाब लागू गरियो, तरल पदार्थ प्रवाह भयो, जब दबाब जारी गरियो, प्रवाह तुरुन्तै रोकियो (चित्र 3d(i))।यो कार्य काजको द्रुत लोचदार रिटर्न द्वारा व्याख्या गर्न सकिन्छ, जसले लिभरलाई ब्लकको विरुद्धमा थिच्छ, चेम्बर बन्द गर्दछ।जे होस्, तरल पदार्थ CV यन्त्रमा प्रवाह गर्न जारी रह्यो, अन्ततः दबाब जारी भएपछि लगभग 100 μl को एक अप्रत्याशित तरल पदार्थ भोल्युमको परिणामस्वरूप (चित्र 3d(ii) र पूरक चलचित्र S4)।यो पहिलो इन्जेक्सन पछि CV को पूर्ण भिजेमा केशिका पिनिङ प्रभाव को गायब द्वारा व्याख्या गर्न सकिन्छ।
एउटै यन्त्रमा भिज्ने क्षमता र चिपचिपापनको तरल पदार्थहरू ह्यान्डल गर्ने क्षमता POCT अनुप्रयोगहरूको लागि चुनौती बनेको छ।कमजोर ओसिलोपनले च्यानलहरूमा चुहावट वा अन्य अप्रत्याशित प्रवाह व्यवहार निम्त्याउन सक्छ, र सहायक उपकरणहरू जस्तै भर्टेक्स मिक्सरहरू, सेन्ट्रीफ्यूजहरू र फिल्टरहरू प्रायः अत्यधिक चिपचिपा तरल पदार्थहरू तयार गर्न आवश्यक हुन्छ 52।हामीले क्रिटिकल प्रेसर र तरल पदार्थको गुणहरू बीचको सम्बन्ध परीक्षण गर्‍यौं (भिन्नता र चिपचिपापनको विस्तृत दायराको साथ)।परिणामहरू तालिका 1 र भिडियो S5 मा देखाइएको छ।यो देख्न सकिन्छ कि विभिन्न भिजेको र चिपचिपापनका तरल पदार्थहरू च्याम्बरमा बन्द गर्न सकिन्छ, र जब दबाब लागू गरिन्छ, 5500 cP सम्मको चिपचिपाहट भएका तरल पदार्थहरू पनि छेउछाउको च्याम्बरमा स्थानान्तरण गर्न सकिन्छ, जसले उच्च नमूनाहरू पत्ता लगाउन सम्भव बनाउँदछ। चिपचिपापन (अर्थात् थूक, श्वासप्रश्वाससम्बन्धी रोगहरूको निदानको लागि प्रयोग गरिने धेरै चिसो नमूना)।
माथिको बहु-कार्यात्मक वितरण उपकरणहरू संयोजन गरेर, FAST-आधारित POCT उपकरणहरूको विस्तृत दायरा विकास गर्न सकिन्छ।उदाहरण चित्र १ मा देखाइएको छ। बिरुवामा प्रि-स्टोरेज चेम्बर, मिक्सिङ चेम्बर, प्रतिक्रिया कक्ष र फोहोर कक्ष हुन्छ।अभिकर्मकहरू विस्तारित अवधिको लागि पूर्व-भण्डारण कक्षमा भण्डारण गर्न सकिन्छ र त्यसपछि मिक्सिङ चेम्बरमा डिस्चार्ज गर्न सकिन्छ।सही दबाबको साथ, मिश्रित प्रतिक्रियाहरू छनौट रूपमा फोहोर कक्ष वा प्रतिक्रिया कक्षमा स्थानान्तरण गर्न सकिन्छ।
किनभने PCR पत्ता लगाउने H1N1 र COVID-19 जस्ता रोगजनकहरू पत्ता लगाउनको लागि सुनको मानक हो र यसले धेरै प्रतिक्रिया चरणहरू समावेश गर्दछ, हामीले PCR पत्ता लगाउनको लागि FAST-POCT प्लेटफर्मलाई अनुप्रयोगको रूपमा प्रयोग गर्यौं।अंजीर मा।4 ले FAST-POCT प्लेटफर्म प्रयोग गरेर PCR परीक्षण प्रक्रिया देखाउँछ।पहिले, एल्युटिंग अभिकर्मक, चुम्बकीय माइक्रोबिड अभिकर्मक, धुने समाधान A, र धुने समाधान W लाई क्रमशः पूर्व-भण्डारण कक्ष E, M, W1 र W2 मा पाइप गरिएको थियो।आरएनए अवशोषणका चरणहरू चित्रमा देखाइएको छ।4a र निम्नानुसार छन्: (1) जब दबाब P1 (= 0.26 बार) लागू गरिन्छ, नमूना च्याम्बर M मा सर्छ र मिक्सिङ चेम्बरमा डिस्चार्ज हुन्छ।(२) हावाको चाप P2 (= ०.१२ बार) मिक्सिङ च्याम्बरको तल्लो भागमा जोडिएको पोर्ट A मार्फत आपूर्ति गरिन्छ।यद्यपि धेरै मिक्सिङ विधिहरूले POCT प्लेटफर्महरूमा तरल पदार्थहरू मिश्रण गर्न आफ्नो सम्भावना देखाएको छ (जस्तै सर्पेन्टाइन मिश्रण 53, अनियमित मिश्रण 54 र ब्याच मिश्रण 55), तिनीहरूको मिश्रणको दक्षता र प्रभावकारिता अझै पनि सन्तोषजनक छैन।यसले बबल मिक्सिङ विधि अपनाउँछ, जसमा हावालाई तरल पदार्थमा बुलबुले बनाउनको लागि मिक्सिङ च्याम्बरको तल्लो भागमा प्रवेश गरिन्छ, त्यसपछि शक्तिशाली भर्टेक्सले केही सेकेन्डमा पूर्ण मिश्रण हासिल गर्न सक्छ।बबल मिश्रण प्रयोगहरू गरियो र परिणामहरू पूरक चित्र S6 मा प्रस्तुत गरिएका छन्।यो देख्न सकिन्छ कि जब 0.10 बारको दबाब लागू हुन्छ, पूर्ण मिश्रण लगभग 8 सेकेन्ड लाग्छ।0.20 बारमा दबाब बढाएर, पूर्ण मिश्रण लगभग 2 सेकेन्डमा प्राप्त हुन्छ।मिक्सिङ दक्षता गणना गर्नका लागि विधिहरू विधिहरू खण्डमा प्रस्तुत गरिएका छन्।(3) मोतीहरू निकाल्न रुबिडियम चुम्बक प्रयोग गर्नुहोस्, त्यसपछि पोर्ट P मार्फत P3 (= 0.17 बार) लाई फोहोर कक्षमा सार्नको लागि दबाब दिनुहोस्।अंजीर मा।4b,c ले नमूनाबाट अशुद्धता हटाउनका लागि धुने चरणहरू निम्नानुसार देखाउँदछ: (1) चेम्बर W1 बाट धुने समाधान A दबाब मिक्सिंग चेम्बर P1 मा डिस्चार्ज हुन्छ।(2) त्यसपछि बबल मिश्रण प्रक्रिया गर्नुहोस्।(3) धुने समाधान A फोहोर तरल च्याम्बरमा स्थानान्तरण गरिन्छ, र मिक्सिङ च्याम्बरमा माइक्रोबिडहरू चुम्बकद्वारा तानिन्छ।धुने W (Fig. 4c) A (Fig. 4b) धुने जस्तै थियो।यो ध्यान दिनुपर्छ कि प्रत्येक धुने चरण A र W दुई पटक प्रदर्शन गरिएको थियो।चित्र 4d ले मोतीबाट आरएनए एल्युट गर्न इल्युसन चरणहरू देखाउँछ;उत्सर्जन र मिश्रण परिचय चरणहरू माथि वर्णन गरिएका आरएनए सोस्ने र धुने चरणहरू जस्तै हुन्।P3 र P4 (= 0.23 बार) को दबाब अन्तर्गत इल्युसन अभिकर्मकहरूलाई PCR प्रतिक्रिया कक्षमा स्थानान्तरण गर्दा, PCR प्रतिक्रिया कक्षको हातलाई बन्द गर्नको लागि महत्वपूर्ण दबाब पुग्छ।त्यसैगरी, P4 दबाबले पनि फोहोर कक्षमा जाने बाटो बन्द गर्न मद्दत गर्छ।यसरी, मल्टिप्लेक्स पीसीआर प्रतिक्रियाहरू प्रारम्भ गर्न सबै इल्युसन अभिकर्मकहरू चार पीसीआर प्रतिक्रिया कक्षहरू बीच समान रूपमा वितरित गरियो।माथिको प्रक्रिया पूरक चलचित्र S6 मा प्रस्तुत गरिएको छ।
आरएनए शोषण चरणमा, नमूना इनलेट M मा प्रस्तुत गरिन्छ र पहिले भण्डार गरिएको मनका समाधानको साथ मिक्सिङ च्याम्बरमा इन्जेक्सन गरिन्छ।ग्रेन्युलहरू मिलाएर र हटाउने पछि, अभिकर्मकहरू फोहोर कक्षमा वितरण गरिन्छ।b र c धुने चरणहरू, विभिन्न पूर्व-भंडारित धुने अभिकर्मकहरू मिक्सिङ चेम्बरमा प्रस्तुत गर्नुहोस्, र मोतीहरू मिलाएर र हटाएपछि, अभिकर्मकहरूलाई फोहोर तरल कक्षमा स्थानान्तरण गर्नुहोस्।d इलुसन चरण: इल्युसन अभिकर्मकहरू, मिश्रण र मनका निकासीको परिचय दिएपछि, अभिकर्मकहरूलाई PCR प्रतिक्रिया कक्षमा स्थानान्तरण गरिन्छ।कर्भहरूले विभिन्न चरणहरूको कार्यप्रवाह र सम्बन्धित प्यारामिटरहरू देखाउँछन्।दबाब भनेको व्यक्तिगत चेम्बरहरू मार्फत लगाइने दबाब हो।भोल्युम मिक्सिङ चेम्बरमा तरल पदार्थको मात्रा हो।सबै स्केल बारहरू 1 सेमी छन्।कच्चा डाटा कच्चा डाटा फाइल रूपमा प्रदान गरिन्छ।
एक PCR परीक्षण प्रक्रिया गरिएको थियो र पूरक चित्र S7 ले 20 मिनेट रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन समय र 60 मिनेट थर्मल साइकल चलाउने समय (95 र 60 °C) सहित थर्मल प्रोफाइलहरू प्रस्तुत गर्दछ, एउटा थर्मल चक्र 90 s (पूरक चलचित्र S7) भएको थियो।।FAST-POCT लाई परम्परागत RT-PCR (एउटा थर्मल चक्रको लागि 180 सेकेन्ड) भन्दा एउटा थर्मल चक्र (90 सेकेन्ड) पूरा गर्न कम समय चाहिन्छ।यसलाई उच्च सतह क्षेत्र र भोल्युम अनुपात र माइक्रो-पीसीआर प्रतिक्रिया कक्षको कम थर्मल जडत्व द्वारा व्याख्या गर्न सकिन्छ।च्याम्बर सतह 96.6 mm2 छ र चेम्बर भोल्युम 25 mm3 छ, सतह देखि भोल्युम अनुपात लगभग 3.86 बनाउँछ।पूरक चित्र S10 मा देखिएझैं, हाम्रो प्लेटफर्मको PCR परीक्षण क्षेत्रको पछाडिको प्यानलमा एउटा खाली छ, PCR च्याम्बरको तल्लो भाग 200 µm बाक्लो बनाइएको छ।तापक्रम नियन्त्रकको तताउने सतहमा थर्मली कन्डक्टिभ लोचदार प्याड जोडिएको छ, परीक्षण बाकसको पछाडिको भागसँग कडा सम्पर्क सुनिश्चित गर्दै।यसले प्लेटफर्मको थर्मल जडत्व घटाउँछ र तताउने/चिसो गर्ने क्षमतामा सुधार गर्छ।थर्मल साइकल चलाउँदा, प्लेटफर्ममा एम्बेडेड प्याराफिन पग्लन्छ र PCR प्रतिक्रिया कक्षमा बग्छ, अभिकर्मक वाष्पीकरण र वातावरणीय प्रदूषण रोक्न सीलेन्टको रूपमा काम गर्दछ (पूरक चलचित्र S8 हेर्नुहोस्)।
माथि वर्णन गरिएका सबै PCR पत्ता लगाउने प्रक्रियाहरू प्रोग्राम गरिएको दबाब नियन्त्रण एकाइ, चुम्बकीय निकासी इकाई, तापक्रम नियन्त्रण इकाई, र फ्लोरोसेन्ट सिग्नल क्याप्चर र प्रशोधन एकाइ समावेश गरी अनुकूलित FAST-POCT उपकरण प्रयोग गरेर पूर्ण रूपमा स्वचालित थिए।ध्यान दिनुहोस्, हामीले RNA अलगावको लागि FAST-POCT प्लेटफर्म प्रयोग गर्यौं र त्यसपछि तुलनाको लागि FAST-POCT प्रणाली र डेस्कटप PCR प्रणाली प्रयोग गरेर PCR प्रतिक्रियाहरूको लागि निकालिएको RNA नमूनाहरू प्रयोग गर्‍यौं।नतिजाहरू लगभग पूरक चित्र S8 मा देखाइएका जस्तै थिए।अपरेटरले एउटा साधारण कार्य गर्दछ: नमूनालाई M-चेम्बरमा परिचय गराउँछ र प्लेटफर्मलाई उपकरणमा घुसाउँछ।परिमाणात्मक परीक्षण परिणामहरू लगभग 82 मिनेटमा उपलब्ध छन्।FAST-POCT उपकरणहरूको बारेमा विस्तृत जानकारी पूरक चित्रमा फेला पार्न सकिन्छ।C9, C10 र C11।
इन्फ्लुएन्जा A (IAV), B (IBV), C (ICV) र D (IDV) भाइरसहरूबाट हुने इन्फ्लुएन्जा एक सामान्य विश्वव्यापी घटना हो।यी मध्ये, IAV र IBV सबैभन्दा गम्भीर केसहरू र मौसमी महामारीहरूका लागि जिम्मेवार छन्, जसले विश्वको जनसंख्याको 5-15% लाई संक्रमित गर्दछ, 3-5 मिलियन गम्भीर केसहरू निम्त्याउँछ र वार्षिक 290,000-650,000 मृत्युहरू निम्त्याउँछ।श्वासप्रश्वास रोग ५६,५७।IAV र IB को प्रारम्भिक निदान बिरामीता र सम्बन्धित आर्थिक बोझ कम गर्न आवश्यक छ।उपलब्ध डायग्नोस्टिक प्रविधिहरू मध्ये, रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पोलिमरेज चेन रियाक्सन (RT-PCR) सबैभन्दा संवेदनशील, विशिष्ट र सटीक (>99%)58,59 मानिन्छ।उपलब्ध डायग्नोस्टिक प्रविधिहरू मध्ये, रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पोलिमरेज चेन रियाक्सन (RT-PCR) सबैभन्दा संवेदनशील, विशिष्ट र सटीक (>99%)58,59 मानिन्छ।Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетевлеция чной и точной (> ९९%)५८,५९।उपलब्ध निदान विधिहरू मध्ये, रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पोलिमरेज चेन रियाक्सन (RT-PCR) लाई सबैभन्दा संवेदनशील, विशिष्ट र सटीक (> 99%) 58,59 मानिन्छ। IS доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считаетется цепностический й и точной (>99%)58,59।उपलब्ध निदान विधिहरू मध्ये, रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पोलिमरेज चेन रियाक्सन (RT-PCR) सबैभन्दा संवेदनशील, विशिष्ट र सटीक (>99%)58,59 मानिन्छ।यद्यपि, परम्परागत RT-PCR विधिहरूमा स्रोत-सीमित सेटिङहरूमा पेशेवरहरूले तिनीहरूको प्रयोगलाई सीमित गर्दै तरल पदार्थको बारम्बार पाइपिङ, मिश्रण, वितरण र स्थानान्तरण आवश्यक हुन्छ।यहाँ, FAST-POCT प्लेटफर्म IAV र IBV को PCR पत्ता लगाउनको लागि प्रयोग गरिएको थियो, क्रमशः तिनीहरूको पहिचानको तल्लो सीमा (LOD) प्राप्त गर्न।थप रूपमा, IAV र IBV लाई प्रजातिहरूमा विभिन्न प्रकारका प्याथोटाइपहरू बीच भेदभाव गर्न मल्टिप्लेक्स गरिएको छ, आनुवंशिक विश्लेषण र रोगको सही उपचार गर्ने क्षमताको लागि एक आशाजनक प्लेटफर्म प्रदान गर्दछ।
अंजीर मा।5a ले नमूनाको रूपमा शुद्ध भाइरल आरएनएको 150 μl प्रयोग गरी HAV PCR परीक्षणको नतिजा देखाउँछ।अंजीर मा।5a(i) ले देखाउँछ कि 106 प्रतिलिपिहरू/ml को HAV एकाग्रतामा, फ्लोरोसेन्स तीव्रता (ΔRn) 0.830 सम्म पुग्न सक्छ, र जब एकाग्रता 102 प्रतिलिपिहरू/ml मा घटाइन्छ, ΔRn अझै 0.365 पुग्न सक्छ, जुन त्यो भन्दा उच्चसँग मेल खान्छ। खाली नकारात्मक नियन्त्रण समूह (0.002), लगभग 100 गुणा बढी।छवटा स्वतन्त्र प्रयोगहरूमा आधारित परिमाणको लागि, IAV (Fig. 5a(ii)), R2 = 0.993, 102-106 प्रतिलिपिहरू/mL को दायराको लग एकाग्रता र चक्र थ्रेसहोल्ड (Ct) बीच एक रेखीय क्यालिब्रेसन वक्र उत्पन्न गरिएको थियो।परिणामहरू परम्परागत RT-PCR विधिहरूसँग राम्रो सम्झौतामा छन्।अंजीर मा।5a(iii) ले FAST-POCT प्लेटफर्मको 40 चक्र पछि परीक्षण परिणामहरूको फ्लोरोसेन्ट छविहरू देखाउँछ।हामीले पत्ता लगायौं कि FAST-POCT प्लेटफर्मले HAV लाई 102 प्रति/mL को रूपमा कम पत्ता लगाउन सक्छ।यद्यपि, परम्परागत विधिमा 102 प्रतिलिपिहरू/एमएलमा Ct मान हुँदैन, यसले लगभग 103 प्रतिलिपिहरू/एमएलको LOD बनाउँछ।हामीले परिकल्पना गर्यौं कि यो बबल मिश्रणको उच्च दक्षताको कारण हुन सक्छ।PCR परीक्षण प्रयोगहरू विभिन्न मिश्रण विधिहरू मूल्याङ्कन गर्न शुद्ध IAV RNA मा प्रदर्शन गरिएको थियो, जसमा शेक मिक्सिङ (परम्परागत RT-PCR सञ्चालनमा जस्तै समान मिश्रण विधि), शीशी मिश्रण (यो विधि, 0.12 बारमा 3 s) र नियन्त्रण समूहको रूपमा कुनै मिश्रण छैन। ।।परिणामहरू पूरक चित्र S12 मा फेला पार्न सकिन्छ।यो देख्न सकिन्छ कि उच्च आरएनए एकाग्रतामा (106 प्रतिलिपिहरू/एमएल), विभिन्न मिश्रण विधिहरूको Ct मानहरू बबल मिश्रणको लागि लगभग समान छन्।जब RNA एकाग्रता 102 प्रति/mL मा झर्यो, शेक मिक्स र नियन्त्रणको कुनै Ct मान थिएन, जबकि बबल मिक्स विधिले अझै पनि 36.9 को Ct मान दिन्छ, जुन 38 को Ct थ्रेसहोल्ड भन्दा तल थियो। परिणामहरूले एक प्रभावशाली मिश्रण विशेषता देखाउँदछ। vesicles, जुन अन्य साहित्यमा पनि प्रदर्शन गरिएको छ, जसले FAST-POCT प्लेटफर्मको संवेदनशीलता परम्परागत RT-PCR भन्दा अलि बढी किन हुन्छ भनेर पनि व्याख्या गर्न सक्छ।अंजीर मा।5b ले 101 देखि 106 प्रति/ml सम्मको शुद्ध IBV RNA नमूनाहरूको PCR विश्लेषणको नतिजा देखाउँछ।परिणामहरू IAV परीक्षण जस्तै थिए, R2 = 0.994 र 102 प्रतिलिपिहरू/mL को LOD प्राप्त गर्दै।
TE बफरलाई नकारात्मक नियन्त्रण (NC) को रूपमा प्रयोग गरी 106 देखि 101 प्रति/mL सम्मको IAV सांद्रता भएको इन्फ्लुएन्जा ए भाइरस (IAV) को PCR विश्लेषण।(i) वास्तविक समय प्रतिदीप्ति वक्र।(ii) FAST र परम्परागत परीक्षण विधिहरूको लागि लॉगरिथमिक IAV RNA एकाग्रता र चक्र थ्रेसहोल्ड (Ct) बीचको रैखिक क्यालिब्रेसन वक्र।(iii) 40 चक्र पछि IAV FAST-POCT फ्लोरोसेन्ट छवि।b, इन्फ्लुएन्जा बी भाइरस (IBV) को PCR पत्ता लगाउने (i) वास्तविक समय प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रम।(ii) रैखिक क्यालिब्रेसन वक्र र (iii) 40 चक्र पछि FAST-POCT IBV प्रतिदीप्ति छवि।FAST-POCT प्लेटफर्म प्रयोग गरेर IAV र IBV को लागि पत्ता लगाउने तल्लो सीमा (LOD) 102 प्रतिलिपिहरू/mL थियो, जुन परम्परागत विधिहरू (103 प्रतिलिपिहरू/mL) भन्दा कम छ।ग IAV र IBV को लागि मल्टिप्लेक्स परीक्षण परिणाम।GAPDH लाई सकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो र TE बफरलाई सम्भावित प्रदूषण र पृष्ठभूमि प्रवर्धन रोक्न नकारात्मक नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो।चार फरक नमूना प्रकारहरू छुट्याउन सकिन्छ: (1) GAPDH-मात्र नकारात्मक नमूनाहरू ("IAV-/IBV-");(2) IAV र GAPDH सँग IAV संक्रमण ("IAV+/IBV-");(3) IBV संक्रमण ("IAV-/IBV+") IBV र GAPDH सँग;(4) IAV/IBV संक्रमण ("IAV+/IBV+") IAV, IBV र GAPDH सँग।बिन्दु रेखाले थ्रेसहोल्ड रेखालाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।n = 6 जैविक रूपमा स्वतन्त्र प्रयोगहरू प्रदर्शन गरिएको थियो, डेटा ± मानक विचलनको रूपमा देखाइन्छ।कच्चा डाटा कच्चा डाटा फाइल रूपमा प्रस्तुत गरिन्छ।
अंजीर मा।5c ले IAV/IBV को लागि मल्टिप्लेक्सिङ परीक्षणको नतिजा देखाउँछ।यहाँ, भाइरस lysate शुद्ध RNA को स्थानमा नमूना समाधानको रूपमा प्रयोग गरिएको थियो, र IAV, IBV, GAPDH (सकारात्मक नियन्त्रण) र TE बफर (नकारात्मक नियन्त्रण) को लागि चार प्राइमरहरू FAST-POCT प्लेटफर्मको चार फरक प्रतिक्रिया कक्षहरूमा थपियो।सम्भावित प्रदूषण र पृष्ठभूमि वृद्धि रोक्न यहाँ सकारात्मक र नकारात्मक नियन्त्रणहरू प्रयोग गरिन्छ।परीक्षणहरूलाई चार समूहमा विभाजन गरिएको थियो: (1) GAPDH-नकारात्मक नमूनाहरू ("IAV-/IBV-");(2) IAV-संक्रमित ("IAV+/IBV-") विरुद्ध IAV र GAPDH;(3) IBV-।संक्रमित ("IAV-") -/IBV+") IBV र GAPDH;(4) IAV/IBV ("IAV+/IBV+") IAV, IBV र GAPDH सँग संक्रमण।अंजीर मा।5c ले देखाउँछ कि जब नकारात्मक नमूनाहरू लागू गरिएको थियो, सकारात्मक नियन्त्रण कक्षको फ्लोरोसेन्स तीव्रता ΔRn 0.860 थियो, र IAV र IBV को ΔRn नकारात्मक नियन्त्रण (0.002) जस्तै थियो।IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ र IAV+/IBV+ समूहहरूको लागि, IAV/GAPDH, IBV/GAPDH र IAV/IBV/GAPDH क्यामेराहरूले क्रमशः महत्त्वपूर्ण प्रतिदीप्ति तीव्रता देखाए, जबकि अन्य क्यामेराहरूले पनि पृष्ठभूमिमा प्रतिदीप्ति तीव्रता देखाए। थर्मल साइकलिंग पछि 40 को स्तर।माथिका परीक्षणहरूबाट, FAST-POCT प्लेटफर्मले उत्कृष्ट विशिष्टता देखायो र हामीलाई विभिन्न इन्फ्लुएन्जा भाइरसहरू एकैसाथ प्याथोटाइप गर्न अनुमति दियो।
FAST-POCT को क्लिनिकल प्रयोज्यता प्रमाणित गर्न, हामीले IB बिरामीहरू (n=18) र गैर-IB नियन्त्रणहरू (n=18) (चित्र 6a) बाट 36 क्लिनिकल नमूनाहरू (नोज स्वाब नमूनाहरू) परीक्षण गर्‍यौं।बिरामी जानकारी पूरक तालिका 3 मा प्रस्तुत गरिएको छ। IB संक्रमण स्थिति स्वतन्त्र रूपमा पुष्टि भएको थियो र अध्ययन प्रोटोकल Zhejiang विश्वविद्यालय पहिलो सम्बद्ध अस्पताल (Hangzhou, Zhejiang) द्वारा अनुमोदन गरिएको थियो।बिरामीहरूको प्रत्येक नमूनालाई दुई श्रेणीमा विभाजन गरिएको थियो।एउटालाई FAST-POCT प्रयोग गरेर प्रशोधन गरिएको थियो र अर्कोलाई डेस्कटप PCR प्रणाली (SLAN-96P, China) प्रयोग गरेर प्रशोधन गरिएको थियो।दुबै परखहरूले एउटै शुद्धीकरण र पत्ता लगाउने किटहरू प्रयोग गर्छन्।अंजीर मा।6b ले FAST-POCT र परम्परागत रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन PCR (RT-PCR) को नतिजाहरू देखाउँछ।हामीले प्रतिदीप्ति तीव्रता (FAST-POCT) लाई -log2(Ct) सँग तुलना गर्यौं, जहाँ Ct परम्परागत RT-PCR को लागि चक्र थ्रेसहोल्ड हो।दुई विधिहरू बीच राम्रो सहमति थियो।FAST-POCT र RT-PCR ले 0.90 (चित्र 6b) को पियर्सनको अनुपात (r) मानसँग बलियो सकारात्मक सम्बन्ध देखायो।हामीले त्यसपछि FAST-POCT को निदान शुद्धता मूल्याङ्कन गर्यौं।सकारात्मक र नकारात्मक नमूनाहरूको लागि प्रतिदीप्ति तीव्रता (FL) वितरण एक स्वतन्त्र विश्लेषणात्मक उपाय (चित्र 6c) को रूपमा प्रदान गरिएको थियो।FL मानहरू नियन्त्रणहरूमा भन्दा IB बिरामीहरूमा उल्लेखनीय रूपमा उच्च थिए (****P = 3.31 × 10-19; दुई-पुच्छर t-परीक्षण) (चित्र 6d)।अर्को, IBV रिसीभर अपरेटिङ विशेषताहरू (ROC) कर्भहरू प्लट गरिएका थिए।हामीले पत्ता लगायौं कि डायग्नोस्टिक सटीकता धेरै राम्रो थियो, 1 को वक्र अन्तर्गत क्षेत्र (चित्र 6e) संग।कृपया ध्यान दिनुहोस् कि 2020 सम्म कोविड-19 को कारण चीनमा अनिवार्य मास्क अर्डर गरिएको कारण, हामीले IBD भएका बिरामीहरू पहिचान गरेका छैनौं, त्यसैले सबै सकारात्मक क्लिनिकल नमूनाहरू (अर्थात, नाक स्वाब नमूनाहरू) IBV को लागि मात्र थिए।
क्लिनिकल अध्ययन डिजाइन।FAST-POCT प्लेटफर्म र परम्परागत RT-PCR प्रयोग गरी 18 बिरामी नमूनाहरू र 18 गैर-इन्फ्लुएन्जा नियन्त्रणहरू सहित कुल 36 नमूनाहरू विश्लेषण गरियो।b FAST-POCT PCR र परम्परागत RT-PCR बीचको विश्लेषणात्मक स्थिरताको मूल्याङ्कन गर्नुहोस्।परिणामहरू सकारात्मक रूपमा सहसंबद्ध थिए (Pearson r = 0.90)।c 18 आईबी बिरामीहरू र 18 नियन्त्रणहरूमा फ्लोरोसेन्स तीव्रता स्तर।d IB बिरामीहरूमा (+), FL मानहरू नियन्त्रण समूह (-) (****P = 3.31 × 10-19; दुई-पुच्छर t-t-test; n = 36) भन्दा महत्त्वपूर्ण रूपमा उच्च थिए।प्रत्येक वर्ग प्लटको लागि, केन्द्रमा रहेको कालो मार्करले मध्यलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ, र बाकसको तल र शीर्ष रेखाहरूले क्रमशः 25 औं र 75 औं शतांशलाई प्रतिनिधित्व गर्दछ।व्हिस्कर्सहरू न्यूनतम र अधिकतम डेटा बिन्दुहरूमा विस्तार हुन्छन्, जसलाई बाहिरी मानिने छैन।e ROC वक्र।डटेड लाइन d ले ROC विश्लेषणबाट अनुमानित थ्रेसहोल्ड मान प्रतिनिधित्व गर्दछ।IBV को लागि AUC 1 हो। कच्चा डाटा कच्चा डाटा फाइलहरूको रूपमा प्रदान गरिन्छ।
यस लेखमा, हामी FAST प्रस्तुत गर्दछौं, जसमा एक आदर्श POCT को लागि आवश्यक विशेषताहरू छन्।हाम्रो टेक्नोलोजीका फाइदाहरू समावेश छन्: (१) बहुमुखी खुराक (क्यास्केड, एक साथ, अनुक्रमिक र चयनात्मक), मागमा रिलीज (लागू दबाबको द्रुत र समानुपातिक रिलीज) र भरपर्दो सञ्चालन (१५० डिग्रीमा कम्पन) (२) दीर्घकालीन भण्डारण। (2 वर्षको द्रुत परीक्षण, लगभग 0.3% वजन घटाउने);(३) तरल पदार्थसँग गीलापन र चिपचिपापनको विस्तृत दायरासँग काम गर्ने क्षमता (5500 cP सम्म चिपचिपापन);(4) आर्थिक (FAST-POCT PCR उपकरणको अनुमानित सामग्री लागत लगभग US$ 1 हो)।मल्टिफंक्शनल डिस्पेन्सरहरू संयोजन गरेर, इन्फ्लुएन्जा A र B भाइरसहरूको PCR पत्ता लगाउनको लागि एक एकीकृत FAST-POCT प्लेटफर्म प्रदर्शन र लागू गरियो।FAST-POCT ले ८२ मिनेट मात्र लिन्छ।36 नाक स्वाब नमूनाहरूको साथ क्लिनिकल परीक्षणहरूले मानक RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रतामा राम्रो सहमति देखायो।36 नाक स्वाब नमूनाहरूको साथ क्लिनिकल परीक्षणहरूले मानक RT-PCR (Pearson coefficients> 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रतामा राम्रो सहमति देखायो।Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности Плуоресценции Плуоресценции стандости irsona > 0,9)।नाक स्वाबको 36 नमूनाहरूको साथ क्लिनिकल परीक्षणहरूले मानक RT-PCR (Pearson's coefficients > 0.9) को फ्लोरोसेन्स तीव्रतासँग राम्रो सम्झौता देखायो। RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со станоресценции со irsona > 0,9)।36 नाक स्वाब नमूनाहरूको क्लिनिकल परीक्षणले मानक RT-PCR (Pearson's coefficient> 0.9) सँग फ्लोरोसेन्स तीव्रताको राम्रो सम्झौता देखायो।यस कामको समानान्तरमा, विभिन्न उदीयमान जैव रासायनिक विधिहरू (जस्तै, प्लाज्मा थर्मल साइकल चलाउने, एम्प्लीफिकेशन-फ्री इम्युनोएसे, र न्यानोबडी फंक्शनलाइजेसन एसेस) ले POCT मा आफ्नो क्षमता देखाएको छ।यद्यपि, पूर्ण एकीकृत र बलियो POCT प्लेटफर्मको अभावको कारण, यी विधिहरूलाई अनिवार्य रूपमा छुट्टै पूर्व-प्रशोधन प्रक्रियाहरू आवश्यक पर्दछ (जस्तै, आरएनए अलगाव ४४, इन्क्युबेशन ४५ र धुने ४६), जसले यी विधिहरूसँग हालको कामलाई थप POCT कार्यहरू कार्यान्वयन गर्न पूरक बनाउँछ। आवश्यक प्यारामिटरहरू।प्राप्त-इन-प्रतिक्रिया-आउटपुट प्रदर्शन।यस कार्यमा, FAST भल्भ सक्रिय गर्न प्रयोग गरिएको हावा पम्प बेन्चटप उपकरण (Fig. S9, S10) मा एकीकृत गर्न पर्याप्त सानो भए तापनि, यसले अझै पनि महत्त्वपूर्ण शक्ति खपत गर्छ र आवाज उत्पन्न गर्छ।सिद्धान्तमा, सानो फारम कारक वायवीय पम्पहरू अन्य माध्यमहरू द्वारा प्रतिस्थापन गर्न सकिन्छ, जस्तै इलेक्ट्रोम्याग्नेटिक बल वा औंला एक्च्युएशनको प्रयोग।थप सुधारहरूमा समावेश हुन सक्छ, उदाहरणका लागि, विभिन्न र विशिष्ट बायोकेमिकल एसेसहरूको लागि किटहरू अनुकूलन गर्ने, नयाँ पत्ता लगाउने विधिहरू प्रयोग गरेर जसलाई तताउने / शीतलन प्रणालीहरू आवश्यक पर्दैन, यसरी PCR अनुप्रयोगहरूको लागि उपकरण-रहित POCT प्लेटफर्म उपलब्ध गराउने।हामी विश्वास गर्छौं कि FAST प्लेटफर्मले तरल पदार्थहरू हेरफेर गर्ने तरिका प्रदान गर्दछ, हामी विश्वास गर्छौं कि प्रस्तावित FAST टेक्नोलोजीले बायोमेडिकल परीक्षणको लागि मात्र होइन, तर वातावरणीय अनुगमन, खाद्य गुणस्तर परीक्षण, सामग्री र औषधि संश्लेषणको लागि पनि साझा प्लेटफर्म सिर्जना गर्ने सम्भावना प्रस्तुत गर्दछ। ।।
मानव नाक स्वाब नमूनाहरू सङ्कलन र प्रयोग Zhejiang विश्वविद्यालय पहिलो सम्बद्ध अस्पताल (IIT20220330B) को नैतिक समिति द्वारा अनुमोदन गरिएको छ।36 वटा नाक स्वाब नमूनाहरू सङ्कलन गरिएको थियो, जसमा 30 वर्ष भन्दा कम उमेरका 16 वयस्क, 7 वयस्क > 40 वर्ष उमेरका, र 19 पुरुष, 17 महिलाहरू थिए।36 वटा नाक स्वाब नमूनाहरू सङ्कलन गरिएको थियो, जसमा 30 वर्ष भन्दा कम उमेरका 16 वयस्क, 7 वयस्क > 40 वर्ष उमेरका, र 19 पुरुष, 17 महिलाहरू थिए।Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старще , 40 ж19ж7ул.३० वर्षभन्दा कम उमेरका १६ वयस्क, ४० वर्षभन्दा माथिका ७ वयस्क, १९ पुरुष र १७ महिलाबाट ३६ वटा नाक स्वाब नमूना सङ्कलन गरिएको थियो ।.जनसांख्यिकीय डेटा पूरक तालिका 3 मा प्रस्तुत गरिएको छ। सबै सहभागीहरूबाट सूचित सहमति प्राप्त गरिएको थियो।सबै सहभागीहरूलाई इन्फ्लुएन्जा भएको शंका गरिएको थियो र क्षतिपूर्ति बिना स्वेच्छाले परीक्षण गरियो।
फास्ट आधार र ढक्कन पोलिल्याक्टिक एसिड (PLA) बाट बनेको छ र Ender 3 Pro 3D प्रिन्टर (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.) द्वारा छापिएको छ।डबल साइड टेप एडेसिभ्स रिसर्च, इंक. मोडेल 90880 बाट खरिद गरिएको थियो। PET फिल्म 100 µm बाक्लो McMaster-Carr बाट खरिद गरिएको थियो।सिल्हूट अमेरिका, इंक बाट सिल्हूट क्यामियो २ कटर प्रयोग गरेर टाँसिएको र पीईटी फिल्म दुवै काटिएको थियो। इलास्टिक फिल्म इन्जेक्सन मोल्डिङद्वारा PDMS सामग्रीबाट बनेको हुन्छ।पहिले, लेजर प्रणालीको प्रयोग गरेर २०० µm बाक्लो PET फ्रेम काटियो र 100 µm डबल-साइड टाँसिएको टेप प्रयोग गरी ३ मिमी बाक्लो PMMA पानामा टाँसियो।PDMS अग्रसर (Sylgard 184; भाग A: भाग B = 10:1, Dow Corning) त्यसपछि मोल्डमा खन्याइयो र अतिरिक्त PDMS हटाउन गिलास रड प्रयोग गरियो।70° C. मा 3 घण्टाको लागि निको पारेपछि, 300 μm बाक्लो PDMS फिलिमलाई मोल्डबाट निकाल्न सकिन्छ।
बहुमुखी वितरण, माग अनुसार प्रकाशन र भरपर्दो कार्यसम्पादनका लागि तस्बिरहरू उच्च गतिको क्यामेरा (सोनी AX700 1000 fps) मार्फत खिचिन्छन्।विश्वसनीयता परीक्षणमा प्रयोग गरिएको ओर्बिटल शेकर SCILOGEX (SCI-O180) बाट खरिद गरिएको थियो।हावाको दबाब हावा कम्प्रेसर द्वारा उत्पन्न हुन्छ, र धेरै डिजिटल परिशुद्धता दबाव नियामकहरू दबाव मान समायोजन गर्न प्रयोग गरिन्छ।प्रवाह व्यवहार परीक्षण प्रक्रिया निम्नानुसार छ।तरल पदार्थको पूर्वनिर्धारित मात्रा परीक्षण उपकरणमा इन्जेक्ट गरिएको थियो र प्रवाह व्यवहार रेकर्ड गर्न उच्च गति क्यामेरा प्रयोग गरिएको थियो।स्थिर तस्बिरहरू त्यसपछि निश्चित समयमा प्रवाह व्यवहारको भिडियोहरूबाट लिइयो, र बाँकी क्षेत्र छवि-प्रो प्लस सफ्टवेयर प्रयोग गरेर गणना गरिएको थियो, जुन त्यसपछि भोल्युम गणना गर्न क्यामेराको गहिराइद्वारा गुणन गरिएको थियो।प्रवाह व्यवहार परीक्षण प्रणालीको विवरण पूरक चित्र S4 मा फेला पार्न सकिन्छ।
50 µl माइक्रोबिड र 100 µl डियोनाइज्ड पानी शीशी मिक्स गर्ने उपकरणमा इन्जेक्ट गर्नुहोस्।०.१ बार, ०.१५ बार र ०.२ बारको दबाबमा प्रत्येक ०.१ सेकेन्डमा उच्च गतिको क्यामेराले मिश्रित कार्यसम्पादन फोटो खिचियो।फोटो प्रशोधन सफ्टवेयर (फोटोशप CS6) प्रयोग गरेर यी तस्बिरहरूबाट ब्लेन्डिङ प्रक्रियाको क्रममा पिक्सेल जानकारी प्राप्त गर्न सकिन्छ।र मिश्रण दक्षता निम्न समीकरण 53 बाट प्राप्त गर्न सकिन्छ।
जहाँ M मिक्सिङ दक्षता हो, N नमूना पिक्सेलको कुल संख्या हो, र ci र \(\bar{c}\) सामान्यीकृत र अपेक्षित सामान्यीकृत सांद्रताहरू हुन्।मिश्रण दक्षता दायरा ० (०%, अमिश्रित) देखि १ (१००%, पूर्ण रूपमा मिश्रित) सम्म हुन्छ।परिणामहरू पूरक चित्र S6 मा देखाइएको छ।
IAV र IBV को लागि वास्तविक समय RT-PCR किट, IAV र IBV RNA नमूनाहरू सहित (बिरालो नम्बर RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China), Tris-EDTA बफर (TE बफर नम्बर B541019) , सांगोन बायोटेक, चीन), सकारात्मक नियन्त्रण आरएनए प्युरिफिकेशन किट (भाग नं. Z-ME-0010, Liferiver, China) र GAPDH Solution (Part No. M591101, Sangon Biotech, China) व्यावसायिक रूपमा उपलब्ध छन्।आरएनए शुद्धिकरण किटमा बाइन्डिङ बफर, वाश ए, वाश डब्ल्यू, एल्युएन्ट, चुम्बकीय माइक्रोबिड र एक्रिलिक क्यारियर समावेश छ।IAV र IBV रियल-टाइम RT-PCR किटहरूमा IFVA न्यूक्लिक एसिड PCR पत्ता लगाउने मिश्रण र RT-PCR इन्जाइम समावेश छ।6 µl AcrylCarrier र 20 µl चुम्बकीय मोती 500 µl बाइन्डिङ बफर समाधानमा थप्नुहोस्, राम्ररी हल्लाउनुहोस् र त्यसपछि मनका समाधान तयार गर्नुहोस्।A र W मा 21 मिलीलीटर इथानोल थप्नुहोस्, क्रमशः A र W को समाधान प्राप्त गर्न राम्ररी हल्लाउनुहोस्।त्यसपछि, IFVA न्यूक्लिक एसिडको साथ 18 µl फ्लोरोसेन्ट पीसीआर मिश्रण र 1 µl RT-PCR इन्जाइम 1 µl TE समाधानमा थपियो, 20 µl IAV र IBV प्राइमरहरू प्राप्त गर्दै, धेरै सेकेन्डका लागि हल्लियो र सेन्ट्रीफ्युज गरियो।
निम्न आरएनए शुद्धिकरण प्रक्रिया पालना गर्नुहोस्: (1) आरएनए शोषण।1.5 एमएल सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमा 526 μl गोलीको घोल पिपेट गर्नुहोस् र नमूनाको 150 μl थप्नुहोस्, त्यसपछि म्यानुअल रूपमा ट्यूबलाई 10 पटक माथि र तल हल्लाउनुहोस्।मिश्रणको 676 μl लाई 60 सेकेन्डको लागि 1.88 x 104 g मा एफिनिटी स्तम्भ र सेन्ट्रीफ्यूजमा स्थानान्तरण गर्नुहोस्।त्यसपछिका नालीहरू खारेज गरिन्छ।(२) धुलाईको पहिलो चरण।एफिनिटी स्तम्भमा 500 μl धुने समाधान A थप्नुहोस्, 40 s को लागि 1.88 x 104 g मा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्, र खर्च गरिएको समाधान खारेज गर्नुहोस्।यो धुलाई प्रक्रिया दुई पटक दोहोर्याइएको थियो।(३) धुलाईको दोस्रो चरण।एफिनिटी स्तम्भमा 500 μl वाश समाधान W थप्नुहोस्, 15 s को लागि 1.88×104 g मा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस् र खर्च गरिएको समाधान खारेज गर्नुहोस्।यो धुलाई प्रक्रिया दुई पटक दोहोर्याइएको थियो।(४) इलुसन।एफिनिटी स्तम्भमा 200 μl एल्युएट थप्नुहोस् र 2 मिनेटको लागि 1.88 x 104 g मा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्।(५) RT-PCR: इल्युएटलाई PCR ट्यूबमा प्राइमर समाधानको 20 μl मा इन्जेक्ट गरिएको थियो, त्यसपछि RT-PCR प्रक्रिया पूरा गर्नको लागि ट्यूबलाई वास्तविक-समय PCR परीक्षण उपकरण (SLAN-96P) मा राखिएको थियो।सम्पूर्ण पत्ता लगाउने प्रक्रियामा लगभग 140 मिनेट लाग्छ (आरएनए शुद्धीकरणको लागि 20 मिनेट र PCR पत्ता लगाउन 120 मिनेट)।
526 µl मनका समाधान, 1000 µl वाश समाधान A, 1000 µl वाश समाधान W, 200 µl इल्युएट र 20 µl प्राइमर सोल्युसन प्रारम्भिक रूपमा थपेर M, W1, W2, E र PCR पत्ता लगाउने चेम्बरहरूमा भण्डारण गरिएको थियो।प्लेटफर्म विधानसभा।त्यसपछि, नमूनाको 150 μl च्याम्बर M मा पाइप गरिएको थियो र FAST-POCT प्लेटफर्मलाई पूरक चित्र S9 मा देखाइएको परीक्षण उपकरणमा सम्मिलित गरियो।लगभग 82 मिनेट पछि, परीक्षण परिणामहरू उपलब्ध थिए।
अन्यथा उल्लेख नगरेसम्म, सबै परीक्षण नतिजाहरू FAST-POCT प्लेटफर्म र जैविक रूपमा स्वतन्त्र नमूनाहरू प्रयोग गरेर न्यूनतम छ वटा प्रतिकृतिहरू पछि औसत ± SD को रूपमा प्रस्तुत गरिन्छ।विश्लेषणबाट कुनै पनि डाटा बहिष्कृत गरिएको थिएन।प्रयोगहरू अनियमित छैनन्।शोधकर्ताहरू प्रयोगको क्रममा समूह कार्यहरूमा अन्धा थिएनन्।
अध्ययन डिजाइनको बारेमा थप जानकारीको लागि, यस लेखमा लिङ्क गरिएको प्रकृति अनुसन्धान रिपोर्ट सार हेर्नुहोस्।
यस अध्ययनको नतिजालाई समर्थन गर्ने डाटा पूरक जानकारीमा उपलब्ध छ।यो लेख मूल डाटा प्रदान गर्दछ।
छागला, जेड र मधुकर, पी. धनी राष्ट्रहरूमा COVID-19 बूस्टरहरूले सबैका लागि खोपहरू ढिलाइ गर्नेछन्।छागला, जेड र मधुकर, पी. धनी राष्ट्रहरूमा COVID-19 बूस्टरहरूले सबैका लागि खोपहरू ढिलाइ गर्नेछन्।छागला, जेड र मधुकर, पी. धनी देशहरूमा COVID-19 बूस्टरहरूले सबैका लागि खोपहरू ढिलाइ गर्नेछन्।छागला, जेड र मधुकर, पी. धनी देशहरूमा COVID-19 पुन: खोपले सबैको लागि खोप ढिलाइ गर्नेछ।राष्ट्रिय चिकित्सा।२७, १६५९–१६६५ (२०२१)।
फाउस्ट, एल एट अल।कम र मध्यम आय भएका देशहरूमा SARS-CoV-2 परीक्षण: निजी स्वास्थ्य सेवा क्षेत्रमा उपलब्धता र किफायती।माइक्रोबियल संक्रमण।२२, ५११–५१४ (२०२०)।
विश्व स्वास्थ्य संस्था।चयन गरिएको उपचार योग्य यौन संचारित संक्रमणहरूको विश्वव्यापी प्रसार र घटनाहरू: एक समीक्षा र अनुमान।जेनेभा: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001)।
Fenton, EM et al।बहु 2D मोल्ड साइड फ्लो परीक्षण स्ट्रिप्स।ASS आवेदन।अल्मा mater।इन्टर मिलान ।१, १२४–१२९ (२००९)।
शिलिंग, केएम एट अल।पूर्ण रूपमा संलग्न microfluidic कागज आधारित विश्लेषण उपकरण।गुदा।रासायनिक।८४, १५७९–१५८५ (२०१२)।
ल्यापेन्टर, एन एट अल।प्रतिस्पर्धात्मक कागज-आधारित इम्युनोक्रोमैटोग्राफी एन्जाइम-परिमार्जित इलेक्ट्रोडको साथ मिलेर मूत्र कोटिनिनको वायरलेस निगरानी र इलेक्ट्रोकेमिकल निर्धारणको लागि अनुमति दिन्छ।सेन्सर २१, १६५९ (२०२१)।
Zhu, X. et al।ग्लुकोमिटर प्रयोग गरेर बहुमुखी नानोजाइम-एकीकृत पार्श्व तरल प्लेटफर्मको साथ रोग बायोमार्करहरूको मात्रा।जैविक सेन्सर।बायोइलेक्ट्रोनिक्स।१२६, ६९०–६९६ (२०१९)।
बू, एस एट अल।गर्भावस्था परीक्षण पट्टी concanavalin A-human chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 हाइब्रिड न्यानोफ्लावर, चुम्बकीय विभाजन र स्मार्ट फोन रिडिङ प्रयोग गरेर रोगजनक ब्याक्टेरिया पत्ता लगाउनको लागि।माइक्रो कम्प्युटर।पत्रिका।१८५, ४६४ (२०१८)।